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賽默飛Qubit 4.0熒光計是一款非常受歡迎的用于核酸和蛋白質精確定量的儀器。它以靈敏度和準確性而著稱,特別適用于樣品量珍貴或濃度較低的分子生物學應用。以下是Qubit 4.0熒光計的主要特點,分為幾個核心方面進行說明:
一、賽默飛Qubit4.0熒光計核心優勢:精準與靈敏
1、靈敏度與特異性:
(1)與基于紫外吸光度(NanoDrop)的測量方法不同,Qubit技術使用熒光染料,這些染料只與特定分子(如dsDNA、ssDNA、RNA、蛋白質)結合并發光。
(2)這意味著它幾乎不受常見污染物如鹽分、溶劑、游離核苷酸、蛋白質或降解核酸(RNA、ssDNA)的干擾。結果比吸光度法可靠得多,尤其對低濃度樣品或粗提樣品。
2、精確定量:
檢測線性范圍寬,能夠提供高度精確的濃度值,這對于需要高精度輸入量的下游應用(如NGS文庫制備、qPCR、克隆)至關重要。
二、賽默飛Qubit4.0熒光計硬件與設計特點
1、直觀的觸摸屏界面:
配備彩色觸摸屏,操作簡單直觀。用戶可以在屏幕上直接選擇檢測程序、查看結果、創建標準曲線和管理數據。
2、內置協議和自動計算:
儀器預裝了所有常用的Qubit檢測試劑盒的標準化程序(如dsDNA HS、dsDNA BR, RNA HS, Protein等)。只需選擇相應 assay,儀器會自動計算并顯示濃度,無需手動計算。
3、USB數據導出功能:
輕松通過USB閃存盤導出實驗結果(CSV或PDF格式),方便后續的數據分析和記錄保存。
三、賽默飛Qubit4.0熒光計功能與性能特點
1、多濃度范圍選擇:
針對同一種分子類型,提供高靈敏度(HS)和寬范圍(BR)兩種檢測模式。例如:
dsDNA HS:適用于0.2-100 ng的樣品,是常用的模式。
dsDNA BR:適用于2-1000 ng的樣品,適用于較高濃度樣品,無需稀釋。
2、免洗檢測技術:
使用專用的Qubit檢測管(0.5 mL)。整個檢測過程無需清洗或擦拭比色皿,只需將200μL左右的 working solution 加入管中,讀數即可,極大減少了操作步驟和潛在誤差。
3、穩定的長期性能:
采用LED光源和濾波器系統,而非昂貴的激光器。LED光源壽命更長,更穩定,維護成本低,確保了儀器長期的可靠性。
四、結論:
1、賽默飛Qubit 4.0的核心特點在于其精準、特異和靈敏。它并非要取代NanoDrop,而是作為其互補技術。在分子生物學實驗室中,常見的做法是:
2、用 NanoDrop 進行快速初步檢查(查看樣品是否有降解、污染大致情況)。
3、用 Qubit 4.0 進行精確定量,以確保下游實驗(如NGS)使用準確數量的樣品,實驗成功率。
4、因此,Qubit 4.0是現代分子生物學實驗室,特別是從事下一代測序(NGS)、實時熒光定量PCR(qPCR)等高級應用工具。