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技術(shù)文章

thermo賽默飛QubitFlex熒光分光光度計可以做什么實驗?

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這是一臺非常強(qiáng)大且專一的定量分析儀器,主要用于對核酸和蛋白質(zhì)進(jìn)行精確定量。簡單來說,它的核心功能就是回答“我的樣本里到底有多少DNA/RNA/蛋白?"這個問題,并且回答得非常準(zhǔn)確。以下是Qubit Flex熒光計可以完成的主要實驗和其核心特點:


一、賽默飛QubitFlex熒光計核心實驗功能:精確定量

Qubit Flex使用的熒光染料技術(shù),這些染料只與特定的目標(biāo)分子(如雙鏈DNA)結(jié)合并發(fā)光,因此不受其他污染物(如RNA、游離核苷酸、鹽離子等)的干擾,結(jié)果比傳統(tǒng)紫外分光光度法(如NanoDrop)更精確、更專一。

1、核酸定量

dsDNA HS/Broad Range Assay: 這是常用的功能。高靈敏度(HS) 模式可精確測量10 pg/μL - 100 ng/μL的微量DNA,非常適合下一代測序(NGS)、微陣列分析、PCR等珍貴樣本。寬范圍(BR) 模式則用于測量濃度更高的樣本。

ssDNA Assay: 專門用于定量單鏈DNA,這在某些分子生物學(xué)應(yīng)用中非常重要。

RNA HS/Broad Range Assay: 專門用于精確測量RNA的濃度,對轉(zhuǎn)錄組學(xué)、qRT-PCR等實驗至關(guān)重要。

miRNA Assay: 無需單獨(dú)分離,可直接從總RNA樣本中精確量化microRNA這類小RNA,對 miRNA研究非常方便。

2、蛋白質(zhì)定量

Protein Assay: 使用與特定氨基酸殘基結(jié)合的熒光染料,精確測量蛋白質(zhì)濃度,范圍是1 - 500 μg/mL。這對于蛋白質(zhì)純化、Western Blot前的樣本準(zhǔn)備等實驗非常有用。


二、賽默飛QubitFlex熒光計優(yōu)勢與高級功能

Qubit Flex不僅僅是臺簡單的定量儀,它的“Flex"(靈活)體現(xiàn)在以下幾個方面:

1、8聯(lián)管高通量檢測:

特點是支持8連管(strip tube),一次最多可以同時檢測8個樣本,極大地提高了效率,特別適合需要處理大量樣本的實驗室。

2、大彩色觸摸屏與直觀界面:

內(nèi)置大型交互式觸摸屏,操作簡單直觀,可以直接在儀器上查看結(jié)果、圖表和實驗設(shè)置。

3、內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)曲線和多種應(yīng)用流程:

儀器內(nèi)置了預(yù)編程的實驗流程(Protocols),用戶只需選擇對應(yīng)的檢測項目(如dsDNA HS),然后按照屏幕指示加入樣品和染料即可,無需自行制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(但每批實驗仍需做1-2個標(biāo)準(zhǔn)點進(jìn)行校準(zhǔn))。

4、支持免提操作(hands-free):在安裝好轉(zhuǎn)子并開始運(yùn)行后,轉(zhuǎn)子會自動旋轉(zhuǎn)到每個孔進(jìn)行測量,無需手動移動樣品管。

5、數(shù)據(jù)管理和輸出:

可以將結(jié)果直接通過USB導(dǎo)出,方便進(jìn)行記錄和進(jìn)一步分析。


三、QubitFlex熒光計典型應(yīng)用場景

1、NGS文庫定量(最關(guān)鍵的應(yīng)用): 在構(gòu)建好NGS測序文庫后,必須對文庫進(jìn)行精確定量,以確保上機(jī)測序時加載的DNA量準(zhǔn)確無誤,這是獲得高質(zhì)量測序數(shù)據(jù)的關(guān)鍵步驟。Qubit Flex的高通量和精確性使其成為NGS平臺的“黃金標(biāo)準(zhǔn)"。

2、qPCR/qRT-PCR模板定量: 準(zhǔn)確定量cDNA或gDNA模板濃度,是確保PCR反應(yīng)效率和結(jié)果可靠性的前提。

3、蛋白質(zhì)組學(xué)分析: 在蛋白質(zhì)提取、純化后,精確測定蛋白濃度,以便在后續(xù)實驗(如酶解、Western Blot)中上樣等量蛋白。

4、質(zhì)量控制(QC): 對提取的核酸或蛋白樣本進(jìn)行質(zhì)量檢查,確保樣本濃度符合下游實驗要求。


四、總結(jié)

Qubit Flex熒光計是一臺專為生命科學(xué)實驗室設(shè)計的高通量、高靈敏度的精密定量儀器。 它的核心價值在于:

1、精準(zhǔn): 對特定目標(biāo)分子(DNA, RNA, Protein)進(jìn)行特異性定量,結(jié)果可靠。

2、高效: 8聯(lián)管設(shè)計適合中高通量樣本檢測,節(jié)省時間。

3、易用: 觸摸屏和內(nèi)置流程使操作非常簡單。


如果您的實驗需要精確知道核酸或蛋白的濃度(尤其是樣品珍貴或濃度很低時),例如進(jìn)行NGS、高級PCR、蛋白質(zhì)研究等,Qubit Flex是非常理想的選擇。如果只是想快速了解一下樣本的大概濃度和純度,NanoDrop則更快捷經(jīng)濟(jì)。許多實驗室會同時配備這兩種儀器,用于不同目的的質(zhì)量控制。

TEL:18016231680

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